果蝇浅室

果蝇浅室 （DSC） 用于研究单个黑腹果蝇的运动行为、成对果蝇之间的相互作用或在大群体中行为的个体果蝇的复杂社会互动。

传统的高天花板暗室为果蝇提供了足够的飞行空间，也为苍蝇提供了充足的空间，但实际使用中果蝇聚集在暗室外围的裂缝或角落中，这使得单相机追踪变得困难。果蝇浅室（DSC）具有低矮的天花板和倾斜墙壁，创造了一个小的浅空间，迫使果蝇形成一个单层个体，防止重叠或因果蝇在沿腔室内不同表面移动时产生的外观变化。

果蝇浅室是一种通用的实验室，具有倾斜的墙壁，而不是带有方角的垂直墙壁。倾斜的墙壁与涂漆玻璃天花板相交，并与房间的水平地板连续。地板表面有孔，用于为果蝇引入食物和水。腔室由上方的荧光灯和下方的红外 LED 灯照亮。摄像头位于腔室上方，用于记录果蝇的行为。

DSC 的设计与典型的传统腔室略有不同，从地板到天花板的墙壁都是垂直的。该腔室有一个 3.5 毫米高的玻璃天花板，涂有硅漆。腔室的其余部分由安装在铝制底座上的透明丙烯酸制成。地板厚度为 5 毫米。腔室的墙壁由两部分组成，一个 S 形倾斜部分从天花板开始，形成 11 度角，继续与第二个直线部分相连，与地板融为一体，形成一个连续的光滑表面。腔室的直径会有所不同，7 厘米用于观察求偶行为，13 厘米用于观察单只果蝇或群体的运动。为了实现均匀的背光，按照与地板类似的曲率从腔室底部去除材料。地板上有多个孔，配有可拆卸的塞子，可用于食物和水的获取。腔室被一个圆柱体包围，圆柱体的盖子由半透明的方格黑白纸制成。一系列荧光灯用于背光，以及来自暗室上方的标准荧光室内灯，以及安装在暗室下方的 12 X 12 英寸 850 nm 红外 LED 阵列。一台数码相机安装在腔室上方的中央。

配置

实验方法

黑腹果蝇被安置在标准的 250 mL 瓶子中，在 25^°C 和 40% 相对湿度下提供标准食品培养基。果蝇种群保持 16 小时的光照到 8 小时的黑暗周期，并在光明和黑暗光周期之间立即过渡。从培养瓶中收集 50 只果蝇，并在测试前一天将它们与食物一起放入标准的 10 mL 果蝇小瓶中。在测试当天早上，在测试前 25 小时将 25 只雄性和 7 只雌性果蝇一起放入仅含有琼脂的标准果蝇小瓶中。在测试求偶行为时，从蛹期孵化 7 小时后隔离处女蝇。将雄性果蝇和 15 只雌性果蝇单独放入装有标准食品的小瓶中，在测试前 4-5 天。

用乙醇清洁整个腔室，并让其干燥 15 分钟。使用口腔移液器将苍蝇转移到腔室中。通过将果蝇冷却至 4⁰C 进行分类和计数来固定它们。试验的跟踪和记录可以使用动物活动轨迹追踪系统进行。对于与求偶行为相关的研究，将一对处女雄性和雌性果蝇放入 7 厘米的腔室中，并记录它们的行为 20 分钟或直到交配开始。对于与果蝇运动相关的研究，在腔室中引入单个或一组最多 50 只果蝇，并记录它们的行为 30 分钟到 1 小时。

数据分析

优势

DSC 的空间体积较浅，迫使所有行为交互都发生在单层中。该设计可防止果蝇相互重叠或遮挡，并减少外观的可变性。该腔室通过促进更多的果蝇在整个中心移动来防止果蝇聚集在角落或外围，从而允许苍蝇之间有更多的互动。DSC 不需要剪掉果蝇的翅膀来防止它们飞行并减少爬上天花板的果蝇数量。房间有一个涂有油漆的天花板，可以防止果蝇在表面湿滑时走动和附着在天花板上，因此果蝇会落回地板上。可以根据实验研究修改腔室的直径和高度。

局限性

DSC 不能用于研究果蝇的飞行，因为腔室的体积小会阻止飞行。行为数据分析的不同方面可能需要多种机器视觉方法或工具。低天花板房间可以防止交配并导致研究求偶行为的问题。