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学习记忆

大小鼠行为学实验 | 新物体探究识别实验方法

实验简介

新物体探究识别实验(Novel Object Recognition,NOR)是评估动物学习记忆能力(尤其涉及非空间记忆、认知灵活性和识别记忆)的经典行为学实验,广泛应用于神经科学、药理学和心理学研究(如阿尔茨海默病模型、药物对记忆的影响等领域)。其核心逻辑基于动物的先天探索本能—— 当动物面对熟悉物体和陌生物体时,会更倾向于花费更多时间探索陌生物体,通过量化这种 “探索偏好” 来判断其记忆提取和识别能力。

 

实验装置

由一个被高墙包围的方形区域组成。区域的大小各不相同,取决于所检查的动物种类。墙壁通常是哑光黑色、白色或透明的,以防止反射。

除了腔室之外,还需要一组不同的物体(至少两个)。

核心原理

新物体探究识别实验的设计完全依赖于动物的 “新奇偏好”(Neophilia) 这一先天行为特征:

初始熟悉阶段——记忆保留阶段(延迟期)——识别测试阶段——结果量化


实验方法

新物体识别测试的目的是测量动物的探索、记忆和物体识别。该测试可用于通过观察假对照组中的动物与治疗或疾病模型组中的动物记忆熟悉物体的能力来比较它们。在此测试期间,受试者暴露于两个物体,其中一个受试者以前接触过并且熟悉。对照动物应该记住熟悉的物体并花更多时间探索新物体,而认知能力受损的动物可能会平等地探索这两个物体。

使用新型异议识别测试评估探索活动和记忆

新型物体识别测试可以在不同程度的测试区域习惯的情况下进行。长期习惯化协议包括连续三天将受试者暴露在空的测试区域五分钟,每天两次。一个简短的习惯协议让受试者在熟悉会议前一天接触测试区域五分钟。或者,习惯化是不必要的,受试者可以直接进入协议的熟悉部分。

习惯化完成一天后,如果进行,受试者会熟悉一个对象。将两个相同的物体放置在测试区域中,彼此相距几厘米,并与该区域的墙壁相距几厘米。打开相机,将拍摄对象放置在面向物体对面的测试区域,让它自由探索。使用秒表测量受试者探索物体所花费的时间。当受试者探索物体总共二十秒或十分钟后,将动物从该区域移开并返回其家笼子。

在受试者熟悉一个对象后,可以执行测试会话。在这个会话中,受试者接触到两个不同的对象,一个与熟悉会话中使用的对象相同,一个是新颖的。这些对象放置在与熟悉会话期间相同的位置。打开相机,将拍摄对象放置在面向物体对面的测试区域,让它自由探索。与它熟悉的对象相比,受试者应该花更多的时间探索新奇的对象。在主题探索新对象 20 秒后或经过 10 分钟后将其移除。


检测数据

1. 核心认知指标

  • 探索时间(Exploration Time)

o 定义:动物鼻尖距离物体≤2cm或直接接触物体的时间总和。

o 正常值:啮齿类对新奇物体的探索时间占比>60%,熟悉物体<40%。 

  • 辨别指数(Discrimination Index, DI)

o 公式:DI = (新物体探索时间 - 熟悉物体探索时间) / 总探索时间 × 100%

o 意义:DI>0表明动物能区分新旧物体,DI=0表示无记忆能力。

  • 首次进入潜伏期(Latency to First Approach)

o 定义:首次接近新奇物体的时间,反映好奇心与动机强度。

2. 行为效率指标

  • 路径效率(Path Efficiency)

定义:实际探索路径长度与最短路径的比值,效率<70%提示空间导航障碍。

  • 总移动距离:反映运动功能与探索活跃度,焦虑模型中距离增加(如CRS模型增加30%)。


优势和局限性

优势

1、无应激或低应激

2、实验设计简单,成本低

3、聚焦 “识别记忆”,特异性强

4、适用范围广,不受动物“运动能力”限制


局限

1、结果易受“物体特性”干扰

2、延迟期受限,难以评估长期记忆

3、难以区分“记忆损伤”与“其他认知缺陷”


综上,新物体探究识别实验是评估非空间识别记忆的 “首选低成本实验”,尤其适合低应激、快速筛选的研究场景,但需通过严格控制实验条件规避物体特性、环境干扰等局限,必要时结合其他记忆实验(如 Morris 水迷宫)形成 “非空间 + 空间记忆” 的完整评估体系。

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