实验简介

悬尾实验（Tail Suspension Test, TST）是评估动物抑郁样行为（核心为 “无助行为”） 的经典行为学实验，由 Steru 于 1985 年建立。其核心原理是利用动物被尾部悬挂时 “无法逃离困境” 的场景，通过观察并量化其 “不动时间” 来反映无助感，广泛应用于小鼠，是抗抑郁药物筛选、抑郁模型验证及抑郁机制研究的核心工具之一。

核心实验原理

动物天生具有 “挣扎求生、摆脱束缚” 的本能，被尾部悬挂后，初期会表现出剧烈挣扎行为（如身体扭动、四肢划动、试图翻转）；随着时间推移，当动物意识到无法逃离时，会逐渐减少主动挣扎，进入 “不动状态”（仅保持身体静止下垂，最小化能量消耗）。

这种 “不动时间” 是抑郁样行为的核心指标——不动时间越长，说明动物无助感越强，抑郁样表型越明显；反之，抗抑郁药物干预后，动物不动时间会显著缩短，主动挣扎行为增加。

1.抗抑郁药物筛选：是药物研发中 “体内抗抑郁活性初筛” 的核心实验——候选药物若能显著缩短动物不动时间、增加挣扎时间，提示其可能具有抗抑郁潜力（如氟西汀、文拉法辛等经典药物可降低不动时间）。

2. 抑郁模型验证：用于验证 “应激诱导抑郁模型”（如慢性不可预见性温和应激、社交挫败模型——模型组动物不动时间显著长于正常对照组，证明模型构建成功。

3. 抑郁机制研究：探究基因、神经通路对抑郁样行为的调控（如 5-羟色胺、多巴胺通路），例如敲除 “5-羟色胺受体基因”的小鼠，不动时间会显著增加，为抑郁机制研究提供行为学证据。

实验前准备

■ 实验动物：

● 根据研究目的选择合适品系的啮齿动物。注意不同品系、年龄、性别可能存在基线差异。

● 筛选动物：需选择身体健康状况良好的动物，排除生病、受伤及尾部有炎症的动物；通常不使用大鼠，谨慎选择体重异常过重的啮齿动物（例如用于肥胖模型研究的啮齿动物）。雌性动物需避开发情期（激素波动可能影响行为）

● 避免实验前应激：实验前一周进行单笼饲养；测试前24小时内，忌对实验动物进行其他可能引起应激的操作或实验。

● 提前30-60分钟将实验动物从饲养房间转移至测试区域，以适应新环境。

■ 实验环境：

标准饲养笼，自由饮水、进食。

光照均匀稳定，光强500lx，保持稳定的12：12反向明/暗循环。

室温恒温22±1摄氏度，湿度（50±20）%。

保持室内安静，控制噪声55~70dB，可添加白噪声。

■ 实验装置：

○ 悬尾实验箱（定制咨询客服）

外壳为医用有机板，每个隔间尺寸不低于55cm高* 15cm宽 11.5cm，颜色根据实验动物毛色选择对比度强的纯色。

顶部有平行于地面的铝制悬挂杆，杆中间配置一固定挂钩。

底部选配可拆卸铝托盘，用于手机动物的尿液及粪便。

防爬装置：空心圆柱体，长度4cm，外径1.6cm，聚碳酸酯管材；用于套住小鼠尾巴防止攀爬。

(单悬尾(左侧)、悬尾&强迫游泳(右侧)）

(单隔间（左侧）、四通道（右侧））

小鼠被悬挂在隔间中央，隔间宽度足以防止小鼠与两侧壁接触；相邻隔间中央的隔板为非透明颜色，避免实验动物间互相观察或接触。

PROTOCOL

环境控制  

1. 提前将小鼠运至测试区域，对实验鼠按需进行标记。

2. 关闭环境光，打开白噪声。

3. 固定相机，调整位置、焦距、图像参数等，确保采集到的实验画面清晰完整。 

4. 放置好托盘，清洁箱体，去除干扰物及无关气味。    

对象控制  

1.  用防爬装置套上小鼠尾巴（根据需要选择）  

2.  剪下17cm长的胶带片段，一端粘贴位置在小鼠尾尖2cm处或1/3处，另一端固定于箱体（整个过程需快速完成），保持小鼠尾巴基部与水平面对齐  

3.  小鼠固定好后工作人员快速离开，分析软件即开始录制  

4.  启动测试，在分析软件预设6分钟（2分钟“适应期”+4分钟“记录期”）计时结束后，实验即观察完成  

5.  将动物释放，小心去除胶带，擦拭尾巴，送回饲养笼  

6.  清理托盘中的粪便及尿液，用消毒溶液擦拭实验设备

数据记录分析  

1.  行为检测： 

○ 静止——当老鼠仅通过尾巴悬挂而未进行任何主动行为时，即为静止（持续至少5秒） 

○ 摆动——老鼠持续以垂直姿势移动爪子同时保持身体直立或身体左右移动 

○ 蜷缩——老鼠整个身体进行主动扭转动作

2. 数据分析（主要为后4分钟的行为变化）

○ 单次静止时间：单次静止行为的持续时间

○ 总静止时间：4分钟内累计静止的时间

○ 不动时间百分比：（不动持续时间/240秒）*100%

○ 挣扎次数：主动挣扎/扭动的次数

○ 首次静止潜伏期：从测试开始至第一次出现○ 静止行为的时间

注意事项

1. 胶带固定。小鼠尾部胶带固定点、固定方式均须统一。 

   位置：靠近根部会导致因疼痛挣扎增加，靠近尾尖则胶带易脱落。 

   松紧：过紧易增加小鼠痛感，过松胶带易脱落。  

2. 观察时间不宜超过6分钟，最长不超过10分钟。悬尾实验随时间延长，小鼠感受到的痛苦将成倍增加；且过长的时间对于数据无统计意义。  

3. 同一只动物同一天内不宜重复测试。

悬尾与强迫游泳（TST&FST）

悬尾与强迫游泳类似，实验动物都会被置于一种无法逃脱且有一定压力的环境中，缺乏逃避相关行为则被视为静止不动，静止不动的相关指标则与抑郁状态挂钩。

两种实验差异也十分明显。主要体现在三方面：一是实验环境不同，悬尾实验无需水环境，仅通过尾部悬挂实现，操作更简洁，避免水温、水质等变量干扰；强迫游泳实验依赖控温水箱，需处理水体与动物干燥，步骤更繁琐。二是应激源类型不同，悬尾实验应激源为 “身体束缚与悬空”，强迫游泳实验则叠加 “水环境与体力消耗”，后者对动物的综合应激更强。三是适用场景侧重不同，悬尾实验因操作简便、耗时短，更适合大样本药物初筛；强迫游泳实验因能同时观察游泳、挣扎等多种行为，更适合精细分析动物运动能力与无助感的关联。