■ 实验动物：

根据研究目的选择合适的啮齿动物。常用品系如C57BL/6小鼠。注意不同品系、年龄、性别可能存在基线差异。

如为外购实验动物，建议提前至少一周在实验环境饲养熟悉，避免应激。

■ 实验环境：

标准饲养笼，自由饮水、进食。保持稳定的12：12反向明/暗循环，所有行为学测试应在动物活动期（暗周期）的固定时间点段进行。室温恒温22±1摄氏度，湿度（50±20）%，噪声55~70dB。

■ 实验装置：

用75%酒精擦拭洞板箱内壁及底部，去除上次实验可能遗留的气味，并等待晾干及酒精本身气味散尽；

连接数据及电源线路，固定顶部摄像头，调整焦距；

调整孔板周围光线均匀，且光强在60lx左右。

在洞板装置周围墙上放置3-4个几何形状不同的线索，用以辅助引导空间定位。

每天进行6分钟的适应训练，在此期间，在每个洞下方都放有可获取的小份食物，将小鼠放到洞板装置内部中心，任它们自由探索整个区域，小鼠在此期间将学会在洞中取食这个行为。

每天一共进行4次适应训练，分成两个时段，时段间间隔90min，每个时段内两次训练环节，每次间隔1min。

在此期间，仍然在所有孔洞下方放置食物颗粒，但是仅有四个固定位置的目标孔洞是可以获取食物的，其他非目标孔洞都覆盖有孔的假底，这样可以防止小鼠通过嗅觉线索进行活动。四个目标孔洞一个位于角落区域，一个位于墙壁区域，另外两个位于中心区域。

四次训练随机将各小鼠放到四个角落区域中间的一个，然后小鼠开始探索，直到四个诱饵洞均被找到或者四分钟的计时期到点后结束。

（1）探洞潜伏期：自小鼠被放入孔板起至小鼠头部第一次探出孔板时所需的时间。若潜伏期缩短，表明焦虑样行为缓解。

（2）探洞次数：小鼠在孔板内探洞的总次数。动物把头部伸入孔中为一次，离开后重新回来探究该孔，可计为另一次。若是动物探洞次数和探洞持续时间显著增加，则说明焦虑样行为得到改善，反之为加重。

（3）探洞频率：每分钟单个孔的戳孔次数。（可根据孔洞类型的数量对值进行调整，即除以孔洞对应类型的数量进行修正。）

（4）实验时间：找到所有装有食物诱饵的孔洞所需要的时间。

（5）轨迹长度：动物在一次试验中所行进的距离。

（6）参考记忆错误数：探索非目标孔洞的总次数。

（7）参考记忆比率：探索目标孔洞的总次数（包括初次探索及再次探索）/探索所有孔洞的总次数。比率越高，说明参考记忆能力越好。

（8）工作记忆比率：对目标孔洞进行探索并获得食物奖励的次数/探索目标孔洞的总次数。比率越高，说明工作记忆能力越好。

（9）站立次数：动物在孔板内站立的次数。动物身体直立，两前肢完全脱离地面计为一次。动物站立次数减少说明焦虑样行为得到改善，反之加重。

（10）站立时间：小鼠在孔板内站立持续的时间。

（11）其他精细行为：排便、身体伸展、理毛等。

（12）脚误次数：脚踩空踏入孔洞的次数。次数越多，说明动物运动平衡性越差。

1、可在装置底部填充一层薄垫料或谷物，以防止根据嗅觉辨别洞口。

2、认知测试期间，洞板装置每天旋转90度，以防止利用迷宫内的内部线索确定方向。

3、实验期间，每次实验间隔内装置均需用酒精擦拭，去除气味线索。